Kidney Int ：肾小管生物钟调节功能障碍导致糖尿病病症肾糖异生增强和加重高血糖

故事情节及目的：在糖大肠病高血压中都，肝脏通过提高原大肠中都的重吸收和上调腹腔小管中都的糖异生来促进糖大肠病高血压的发生。然而，血压低水平的慢性增大可能反过来导致糖大肠病肾结石(DN)，这是糖大肠病最严重的癌症之一，其特征是肾小球、小肠和肝脏肺部破损。虽然新陈代谢应激是糖大肠病肾结石发生和发展的主要因素，但在大多数糖大肠病高血压中都，高血压本身并不会导致肾功能不全。这表明，合并症或环境、遗传或表观遗传的变动可能是启逆和/或较快困难重重DN所必需的。生物学钟是一种普遍存在的原子计时有助于，它将肝细胞、有组织和系统的生物学功能与24全程的环境周期定时。局部生物学钟驱逆肝细胞类型和有组织特有的节律，它们的失调与一系列哮喘的发病和/或困难重重有关。然而，糖大肠病高血压肝脏中都内在生物学钟的病理生理作用仍不清楚。

方法律条文：为了解决这个问题，我们用双链脲佐霉菌作用于了足肝细胞(cKOp大鼠)或小肠(cKOt大鼠)中都缺乏昼夜节律转录恒定生物体BMAL1的大鼠患I型糖大肠病。

大鼠框架制备：8周龄Bmal1lox/lox/Nphs2-RTTA/LC1大鼠(cKOp大鼠)或8周龄Bmal1lox/lox/Pax8-RTTA/LC1大鼠(cKOt大鼠)经DOX(饮水中都2 mg/ml)处理过程2再一，Bmal1(ARNTL)基因失活。他们的非常少(Bmal1lox/lox大鼠)做完全一致的DOX病人。在DOX病人结束一再一，通过膀胱针头双链脲佐霉菌(STZ，50 mg/kg体型，每日5天)作用于I型糖大肠病。溶媒处理过程的大鼠做PBS的溶媒针头。所有实验均在最终一次针头STZ或溶媒8再一来进行。在所有实验中都，从ZT9处死的大鼠脸上采集有组织和血清(ZT-Zeitgeber一段时间单位；ZT0是开灯一段时间，ZT12是关灯一段时间)。

新陈代谢笼：大鼠被养在个体新陈代谢胳膊中都(Tecniplast，意大利)。在4天的适应期后来进行24全程的大肠液收集。

肝脏和大肠液生化测：用Vaudois中都心医院诊疗实验室(LCC)测大肠和肝脏Na+、K+、Ca2+、Mg2+、磷酸盐、肌酐、、大肠酸和大肠素浓度及渗透压。用酸碱璇(Metrohm)测大肠液pH值。适用EPOC血清深入研究璇(西门子卫生)测量逆-动脉混合血的血清pH值和血气。大肠铵测换用Berthelot法律条文。大肠可高锰酸钾酸测换用Chan25方法律条文。换用放射免疫法律条文(DPC)测肝脏胱氨酸低水平。用Mercodia的公司的试剂盒测肝脏甲状腺激素。

耐量次测试(GTT)：常在15全程后，给空白非常少和cKOt大鼠膀胱针头(1g/kg体型)。分别于针头之前(t=0)、针头后15、30、60、90、120、180min，用血压读数璇测血压。

甲状腺激素耐量次测试(ITT)：常在4h后，给非常少和cKOt大鼠膀胱针头0.5U/kg体型的重整人甲状腺激素(人重整甲状腺激素，Sigma)。分别于甲状腺激素针头之前(t=0)、甲状腺激素针头后15、30、45、60、90、120、150、180min测血压。如果血压调低2 mm此表，则通过膀胱针头30毫克拯救大鼠，并将其排除在深入研究之外。

RNA测序技术：RNA-SEQ按照Ansermet等人在6.Mus Musculus中都的描绘出来进行。适用GRCm38.92基因注释。适用TMM归一化对基因枚举来进行定标，并适用LIMMA R包27中都的“CPM”函数将其平方根类比为每百万枚举(CPM)。计算出来了KO和Ctrl爬虫类在需注意过程(PBS)和处理过程(STZ)条件下的差异解读以及两者之间的相互作用。对于这三种相对中都的每一种，并不需要FDR

结果：在中风糖大肠病的cKOp和cKOt大鼠中都，生物学钟功能障碍与糖大肠病肾结石的发生没有相关性。然而，与双链脲佐霉菌病人的非常少相比较，中风糖大肠病的cKOt大鼠平庸出加高血压加重，大肠中都排泄提高，多大肠提高，肝脏肥大更明显。mRNA和肝细胞内解读深入研究显示，与糖大肠病非常少大鼠相比较，cKOt糖大肠病大鼠肝脏中都的糖异生必需显著加强。CKOt糖大肠病大鼠的转录深入研究和功能深入研究确定了直接或间接影响糖异生必需的多种有助于的变动。

结论：我们证明了内在小肠生物学钟功能障碍可通过加强肾腹腔小管的糖异生而加重糖大肠病高血压，进一步强调了生物学钟恒定在糖大肠病高血压中都的重要性。

标题出处：

Ansermet C， Centeno G， Bignon Y，et al.Dysfunction of the circadian clock in the kidney tubule leads to enhanced kidney gluconeogenesis and exacerbated hyperglycemia in diabetes.Kidney Int 2021 Nov 24